PicoGreen是一种特异性结合双链DNA dsDNA) 的饱和荧光染料，激发波长为480 nm，发射波长为520 nm，与大多数荧光计和荧光酶标仪兼容。PicoGreen仅与dsDNA结合后才发出荧光，不受核苷酸和单链核酸的影响，产生的荧光强度与dsDNA浓度成正比，且无序列依赖性，非常适合于dsDNA的定量检测，可检出25 pg/ml~1 μg/ml浓度范围内的dsDNA。PicoGree有以下优势：1 灵敏度高：可检测低至200 pg的dsDNA，节省宝贵样品；2 特异性强：在等摩尔的RNA存在的条件下，对dsDNA具有特异性；3 耐受性好：耐受较高浓度的盐、尿素、乙醇、氯仿、去垢剂、蛋白或琼脂糖，可以直接定量PCR扩增产物而无需从反应混合物中纯化DNA。4 易于使用——只需在样品中加入染料，等待5分钟，然后读数即可，且适用于96和384孔板；与大多数基于荧光的酶标仪和荧光计兼容。5 适用范围广：可适用于PCR的分析、芯片样品、DNA损伤分析、酶活分析、基因组DNA定量以及复杂混合物中dsDNA的检测和病毒DNA定量等多种领域。

参考操作：

一．染料工作液的配置 PicoGreen dsDNA定量试剂取出后回温至室温，该试剂是以100 µL 200×的浓缩液形式保存于无水DMSO中的。实验当天，根据实验用量用1×TE（10 mM Tris-HCl，1 mM EDTA，pH 7.5）按1:200 的比例稀释PicoGreen浓缩液。 注意事项：

1 由于试剂容易吸附到玻璃表面，要在塑料容器中配制。

2 PicoGreen试剂见光易降解，所以应将配好的溶液用铝箔包住或放置暗处避光保存。

3 溶液最好在配制好数小时内使用，以保证最佳结果。

二．标准品工作液的配制 取λDNA标准品，用无菌TE buffer配制成100 μg/mL的标准品工作液。

注意事项：标准品也可用其他已知浓度的纯化DNA；有一些产品描述可使用小牛胸腺DNA作为标准品，按照我们实际操作经验，并不推荐它作为标准品。  

三．标准品工作液稀释

1 母液稀释：使用TE缓冲液将100 μg/mL的标准品稀释为2 μg/mL。

2 梯度稀释：参照表1，对DNA标品母液进行梯度稀释。 表1 标曲制作 TE体积（μL） 2 μg∕mL DNA标准品母液（μL） Picogreen染料工作液（μL） DNA标准品终浓度 0 1,000 1,000 1 μg/mL 900 100 1,000 100 ng/mL 990 10 1,000 10 ng/mL 999 1 1,000 1 ng/mL 1,000 0 1,000 Blank  

3 标准曲线的制备：向经稀释的各梯度标准品溶液中加入1 mL染料工作液混匀，避光室温孵育5 min。使用酶标仪或荧光计检测荧光强度（Ex=480 nm，Em=520 nm）；将溶液加入比色皿或取200 μL加入微孔板，确信不要在样品中引入气泡；以1×TE缓冲液空白对照，测定标准品荧光值；用标准品溶液的浓度（ng/mL）对应的荧光强度作直线回归，制备标准曲线。

4 测量剩余样品的荧光值：荧光计将给出一个直接的浓度读数，数据可以用来产生DNA浓度的标准曲线。

注意事项：

为了您的健康，请佩戴一次性手套。

本产品仅限科研用途。